基于网络药理学探讨龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的(4)

3 讨论 Discussion

中医学认为骨关节炎属“痹证”和“骨痹”范畴。骨痹的病因多考虑为外感风邪，遇寒或受热，加之湿邪偏盛，诸邪裹结，合而为痹。而素体骨髓亏虚，肌腠不能抵御邪气，外邪乘隙入侵，是导致骨痹发生的内在因素。中医治疗骨痹讲究辨证论治，旨在通过中草药的配伍，以达到通络止痛、补虚泻实之功效。龟鹿二仙胶方中的龟板胶入肝、肾、肺三经，有滋阴潜阳和益肾健骨之用；鹿角胶归经肝肾，能温补肝肾和益精养血；人参入脾、肺、心经，有大补元气之功；枸杞入肝、肾经，能治肝肾亏虚、腰膝酸软之症。四药合用，能对肾元虚损和精血不足所致的筋骨形体失养从根本上进行治疗。

网络药理学能够从中药成分、靶点与疾病间相互作用的整体性和系统性出发进行研究，特别适宜研究中药“多成分-多靶点-多途径”的作用关系，探明中药的药效物质基础及具体作用机制。文章基于网络药理学方法分析龟鹿二仙胶治疗骨关节炎“化学成分-靶点-通路”之间的关系，探讨了其潜在作用机制。文章通过富集分析得出了龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的主要成分有69个，其中槲皮素、山奈酚和β-谷甾醇等成分可能为龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的关键成分；主要治疗靶点有201 个，其中的白细胞介素6、丝裂原活化蛋白激酶1 和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 等20 个靶点为核心靶点。

在骨关节炎发展过程中，炎症、软骨代谢、细胞凋亡与增殖几种因素是密切关联的，炎症可以导致软骨组织细胞外基质的降解，也可以通过线粒体依赖途径、内质网应激途径以及死亡受体介导的细胞信号转导途径引起软骨细胞凋亡[32]。在龟鹿二仙胶治疗骨关节炎所针对的核心靶点中，白细胞介素1β 由关节中的软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞和滑膜细胞、浸润滑膜的免疫细胞等产生[33]，能强烈诱导蛋白水解酶(如基质金属蛋白酶和聚集蛋白聚糖酶)的表达和释放，并抑制细胞外基质的表达，包括Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖[34]，它还与其他细胞因子如白细胞介素6、白细胞介素8、单核细胞趋化蛋白1 和趋化因子2 起协同作用，进一步增强炎症反应。此外，丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶能调控新陈代谢、细胞增殖、细胞存活、生长和血管生成等过程，这些功能是丝氨酸、苏氨酸单独或者联合通过磷酸化一系列下游底物来介导的，如miR-543能够提升蛋白激酶和B 淋巴细胞瘤-2 基因表达水平，使软骨细胞的增殖得到提升，有效对抗白细胞介素1β 诱导引发的软骨细胞损伤[35-36]。分析以上结果可知，龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的作用与调控炎症、软骨代谢、细胞凋亡与增殖等因素密切相关。

KEGG 富集分析结果显示，龟鹿二仙胶防治骨关节炎可能主要通过调控丝裂原活化蛋白激酶、晚期糖基化终末产物-糖基化终末产物受体、叉头框转录因子O 和低氧诱导因子1 等13 条信号通路发挥作用。其中丝裂原活化蛋白激酶信号通路与骨关节炎软骨损伤具有重要联系，它的激活能调控炎症反应、软骨代谢、细胞凋亡与增殖等多种生物学反应。研究证实，上调miR-24 下调C-myc可以通过失活丝裂原活化蛋白激酶信号通路来抑制软骨细胞凋亡并促进软骨细胞增殖，进而阻止骨关节炎的发生和发展[37]。

图1 ｜“中药-活性成分-疾病靶点”网络Figure 1 ｜Network of “Chinese medicine-active ingredients-disease target”图注：图中蓝色三角形表示疾病靶点，左上淡绿色椭圆形表示龟板胶的活性成分，右上紫红色椭圆形表示鹿角胶活性成分，中上相交黄色椭圆形表示龟板胶和鹿角胶共有活性成分；左下红色椭圆形表示枸杞的活性成分，右下深绿色椭圆形表示人参的活性成分，下中相交黄色椭圆形表示枸杞和人参的共有活性成分

图2 ｜ 龟鹿二仙胶作用靶点PPI 网络(A)及PPI 网络筛选(B)Figure 2 ｜Protein-protein interaction network(A) and protein-protein interaction network screening (B) ofGuilu Erxianjiao图注：图A 中的圆点表示龟鹿二仙胶的作用靶点，每一条边表示靶点间相互作用关系；借助Cytoscape 3.7.2 软件中的CytoNCA 插件对图A进行筛选，得到图B 网络，蓝色方框内为关键靶点，每条线代表靶点间的相互作用关系，说明这些靶点为龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的主要作用靶点

图3 ｜ “筛选靶点-成分 ”网络Figure 3 ｜ Screening target-component network图注：图中蓝色三角形表示20 个关键靶点，青色椭圆形表示这些关键靶点所对应的药物活性成分；每条边表示药物活性成分和靶点之间的关联程度，边数越多，表示两者关联程度越高

文章来源：《现代中医药》 网址: http://www.xdzyyzz.cn/qikandaodu/2021/0208/336.html